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      多因子檢測-Luminex

      多因子檢測樣本的收集和處理

            正確的樣本收集整理方法,是實驗成功至關重要的步驟。目前可以檢測樣本類型有: 細胞上清、血清、血漿。盡管其他生物學樣本沒有經過驗證,但是理論上也可以檢測,這些樣本包括: BAL,唾液,CSF,組織勻漿液和尿液。
      下面我們針對幾種常見樣本的收集、保存方法:


      1、血清
      全血室溫(20-25 °C)凝固20-30min;
      室溫1,000 x g 10min;
      收集上清,或者選擇使用血清分離器;
      可選:如果樣本是高血脂樣本,請先在2-8℃10,000 x g 離心 10min,分離出下層血清;
      多因子檢測血清樣本要求新鮮;如果不能在24h內檢測,需要分裝在-80 ℃保存,避免反復凍融。


      2、血漿
      根據要求選擇檸檬酸或EDTA作為抗凝劑。如果選擇肝素作為抗凝劑,建議每毫升血不超過10IU肝素(肝素用量過高,可能會導致部分檢測指標值偏高)。
      收集抗凝全血后30min內,在4℃下10,000 x g離心10min,分離收集血漿;
      可選:如果樣本是高血脂樣本,請先在2-8℃10,000 x g 離心 10min,分離出下層血漿;
      多因子檢測血漿樣本要求新鮮;如果不能在24h內檢測,需要分裝在-80 ℃保存,避免反復凍融。


      3、細胞培養上清
      檢測分泌性的成份時,最好用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。

      4、組織樣本
      如果可以,請按照參考文獻推薦的方法。標本取完后液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的含有蛋白酶抑制劑的緩沖液, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
      保存過程中如果有沉淀,檢測前樣本應該再次離心去除沉淀,建議16,000 x g 離心5min。

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